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申请风景园林乙级资质时，企业注册资本的限制是不少于100万元人民币。这意味着企业在申请此类资质时，必须证明其注册资本达到了这一数额，以体现其具有承担相应风景园林工程设计项目的能力和经济实力。注册资本作为衡量企业经营规模和风险承受能力的一个重要指标，在资质申报过程中是必不可少的一项基本要求。